Как правильно сдать анализ пцр в гинекологии. Метод ПЦР в гинекологии. ПЦР-диагностика внутриутробных инфекций. Опасность внутриутробной инфекции и пути ее устранения
В гинекологии, для того чтобы сделать определенные исследования используются самые разнообразные методики, одной из которых является мазок на ПЦР (ПЦР - полимеразная цепная реакция). Мазок представляет собой метод исследования, с помощью которого доктор берет небольшое количество биологического материала с поверхности слизистой. Этот метода дает возможность обнаружить различные инфекции в организме, которые первое время никак о себе не сигнализируют.
Как понять результаты исследования?
Генитальный туберкулез является одной из основных причин тяжелого заболевания труб, приводящих к бесплодию. Обычные лабораторные значения не имеют большого значения в диагнозе. Абсолютный диагноз не может быть сделан из характерных признаков гистеросальпингограммы или лапароскопии.
Это исследование включало 72 бесплодных женщин, которые соответствовали критериям включения и исключения. Конкретные диагностические тесты были оценены по этому диагностическому критерию. Согласование результатов между клиническими критериями и конкретными диагностическими тестами было проанализировано по соглашению Каппы.
Данный вид анализа берется в цервикальном канале или слизистой влагалища. Мазок на ПЦР может обнаружить возбудителей инфекции или болезни, основываясь на их генетический материал ДНК.
Как проводят анализ на ПЦР?
Полуженный мазок помещают в специальный реактор, в этом биологическом материале могут присутствовать определенные части ДНК возбудителя инфекции. К взятому образцу добавляются специальные ферменты, которые способны связаться с ДНК микроорганизма а также возобновить его копию. Эта реакция проходит по принципу цепной и после нескольких циклов ее повторения образуется достаточное количество копий, которые можно сравнить с имеющейся в базе информацией о ДНК микроорганизмов. Мазок на ПЦР взятый у женщин позволяет также установить то количество микробов, которое присутствует в организме женщины.
Как сдавать анализы
Туберкулез является хроническим инфекционным заболеванием, и заболеваемость, связанная с этим заболеванием, имеет серьезные последствия для здоровья. Болезнь распространена во всем мире, и в развивающихся странах заболеваемость высока. Болезнь часто остается молчаливой или может проявляться с неспецифической симптоматикой. В результате распространенность генитального туберкулеза в значительной степени недооценивается.
Высокое подозрение, вызванное интенсивными исследованиями, имеет важное значение для диагностики заболевания. Обычные лабораторные значения не имеют большого значения. Хотя абсолютная диагностика не может быть выполнена из характерных признаков гистеросальпингограммы или лапароскопии, лапароскопия является ценной процедурой для получения ткани для культивирования и гистопатологического исследования.
Такая методика помогает с точностью выбрать метод лечения, а также отследить его эффективность.
Какие инфекции позволяет выявить мазок на ПЦР?
В организме может присутствовать большое количество возбудителей инфекций, сюда относятся и «скрытые», которые длительное время никак себя не проявляют.
Анализ мазка на ПЦР позволяет выявить такие инфекции:
Как проводят анализ на ПЦР?
Определенный диагноз может быть сделан положительной культурой микобактерий и путем демонстрации специфического гистопатологического поражения в образце. В последние годы метод полимеразной цепной реакции развился как полезный и быстрый метод диагностики легочного и внелегочного туберкулеза.
Это исследование было проведено в Исследовательском центре фертильности Института акушерства и гинекологии в Ченнаи в сотрудничестве с Исследовательским центром по туберкулезу в Ченнаи и включало 72 бесплодных женщин, которые были зарегистрированы в течение 30 месяцев. Для проведения исследования было получено одобрение этического комитета, и каждому пациенту было получено информированное согласие.
- хламидиоз половых путей;
- гепатит;
- уреплазмоз половых органов;
- кандидоз (молочница);
- микоплазмоз;
- бактериальный вагиноз;
- инфекционный мононуклеоз;
- трихомониаз;
- папиллома вирусная инфекция;
- герпес;
- СПИД (ВИЧ);
- наличие раковых клеток;
- оценить гормональное состояние;
Как берется мазок у женщин?
Для того чтобы взять мазок на ПЦР используют различные биологические материалы (это может быть кровь, слюна, выделения из половых органов, моча). В лабораторных условиях у женщин берется мазок из влагалищной микрофлоры, шейки матки или матки. Мазок берут:
Отбор проб проводили методом удобной выборки. Во время лапароскопии отмечались признаки, указывающие на туберкулез, такие как откровенные бугорки, казеины, гранулемы и бисерные трубки. Также были изучены доказательства прошлой хронической инфекции в виде утолщенных трубок, внутрипросветной казеинизации и терминального гидросальпинкса с трубками в форме реплики, тубо-яичниковой массой, фальшивыми спайками в мешочке Дугласа.
Материал для исследования был собран из предменструального эндометрия, и, по возможности, при лапароскопии был также аспирирован мешочек жидкости Дугласа. В 23 из 72 случаев возможны только мазка, культура и гистопатологическое обследование. Поэтому результаты конкретных тестов оценивались по клиническим критериям только в этих 49 случаях.
- у женщин, которые имели незащищенный половой контакт,
- которые никогда не обследовались,
- у женщин, которые планируют забеременеть.
Показаниями к проведению мазка на ПЦР являются следующие:
- выявление причин бесплодия;
- наличие ИППП в острой фазе;
- тяжело протекающая беременность;
- предположение, что ИППП переходит в хроническую стадию;
- в случае, когда нужно выявить устойчивость вируса к определенному виду антибиотиков.
Во взятый материал добавляют необходимые реактивы, после чего идентифицируют возбудителей или заболевание. Процедура по взятию материала длиться не более 5 минут, она абсолютно безболезненная, а ее результат можно будет узнать уже через 2-4 дня. По его результатам назначают лечение.
Как берется мазок у женщин?
Присутствие казеиновых гранулем, окруженных эпителиидными клетками, лимфоцитами, плазматическими клетками и гигантскими клетками, было диагностикой туберкулеза. Для культуры образец ткани хорошо измельчали с помощью 5 мл стерильной дистиллированной воды. Образец центрифугировали и надосадочную жидкость отбрасывали.
Метод полимеразной цепной реакции. Пациенты были в возрасте от 20 до 35 лет. Менструальные нарушения, такие как вторичная аменорея, олигоменорея и меноррагия, наблюдались в 18 случаях. В 42 случаях, кроме бесплодия, не было других симптомов. В 3 из 72 случаев была история тесного контакта с больными туберкулезом. Положительный туберкулиновый тест наблюдался в 10 случаях со средней величиной 13 мм. В этих 10 случаях было доказательство туберкулеза в девяти случаях.
О чем нужно знать женщине, перед тем как сдавать мазок на ПЦР?
Перед проведение исследования женщине необходимо подготовиться. Уже за месяц перед планируемым анализом необходимо прекратить употребление всех лекарственных препаратов и лечебных процедур.
Стоит учесть, что анализ берётся перед менструацией, либо через 1-4 дня после ее окончания. За 3-4 дня перед анализом необходимо воздержаться от интимных отношений. Обычно материалы берут в тех ситуациях, когда вирус переходит в стадию обострения.
Доказательства кальцификации с помощью ультразвука или рентгеновского живота наблюдались у пяти женщин. Гистеросальпингограмма проводилась в 59 случаях. Характерные особенности, указывающие на генитальный туберкулез, такие как искаженная полость эндометрия, вышитый бисером внешний вид трубок, гидросальпинкс ретортной формы, кальцинированные области и кукурузные блоки были замечены в 35. Лапароскопия была выполнена у всех 72 пациентов, а результаты были наводящими на туберкулез в 43.
При гистопатологическом исследовании пять из 72 образцов эндометрия были положительными для туберкулеза. Из этих пяти были положительными по общепринятым методам, один был положителен только культурой, два - только по гистологии, и только у двух пациентов гистология и культура были положительными.
Отличительные характеристики анализа на ПЦР:
- высокая точность определения типа инфекции;
- для выявления возбудителя достаточно даже 1 его клетки;
- возможность выявить возбудителя в любой жидкой среде;
- достаточно большая скорость определения результатов;
- дает возможность выявить вирус, а не продукты его жизнедеятельности или антитела;
- метод, который с точностью позволяет выявить некоторые виды инфекций.
В сравнении с другими методами исследований данная методика намного меньше дает ложноотрицательные результаты (показывает, что инфекции нет, в то время как она присутствует на самом деле), и с точностью в 99,9% не дает ложно - положительные результаты (присутствие инфекции тогда, когда ее на самом деле нет)
Основываясь на диагностических критериях, разработанных в этом исследовании, 49 случаев были разделены на две группы, и в них были оценены диагностические тесты. Группа А состояла из 28 случаев, в которых подозревался генитальный туберкулез. В группе А два были положительными по культуре. Чувствительность культуры составляла 14 процентов, а специфичность составляла 100 процентов. Согласование результатов между клиническими критериями и культурой по показателю соглашения Каппы было. В этих двух случаях проводилась повторная проверка образцов, и положительность была подтверждена.
Как понять результаты исследования?
Мазок на ПЦР может иметь отрицательный либо позитивный результат.
Позитивный результат свидетельствует о том, что в собранном биологическом материале имеются следы инфекции, а также скачен какие именно.
Отрицательный результат - имеет противоположное значение, и означает что в ходе исследования следов инфекции в материале не обнаружено.
Повторное тестирование проводилось на 5 из 12 отрицательных образцов, и все были признаны отрицательными. Повторная выборка возможна только в три, и все были отмечены как отрицательные. В 3% случаев, кроме бесплодия, других симптомов не было. Аналогичные наблюдения были сделаны и другими авторами.
Менструальные нарушения, такие как вторичная аменорея, олигоменорея и меноррагия, наблюдались в 25% случаев. Но из-за вторичной природы генитального туберкулеза заражающие организмы являются скудными по количеству, пробоотборный участок может не представлять зараженную область, и зараженный сайт может быть легко пропущен. В 50% случаев инфекция может быть ограничена фаллопиевой трубкой. Более того, из-за циклического пролиферации эндометрия гранулемы не имеют достаточного количества времени для образования, поэтому эндометрий может не проявлять признаков туберкулеза во всех циклах.
Мазок на ПЦР и беременность
Если так получилось, что данный вид анализа будущей маме сдавать не приходилось, то его берут уже у беременной женщины, так как это исследование помогает выявить скрытые инфекции, которые могут передаваться половым путем, а также другие скрытые инфекции, которые длительное время не проявляют себя. Они очень могут навредить малышу, или провести к выкидышу, внутриутробным инфекциям или преждевременным родам. Именно поэтому делать данный анализ лучше перед беременностью, во время ее планирования, чтобы не причинить вред ребеночку. Но если вышло, что женщина уже беременна, не стоит бояться сдавать анализ, так как его проведение на ребеночка не влияет. Все материалы берутся с поверхности шейки матки или цервикального канала.
Образец, полученный биопсией, может быть небольшим, и кровоток может быть скудным. По этим причинам для обеспечения максимальной урожайности необходимо собрать несколько экземпляров из нескольких источников. Предположили, что гистология и бактериология являются взаимодополняющими, и ни одна из них не является полностью надежной. Таким образом, было достигнуто согласие между результатами двух праймеров в 71% случаев.
Опасность внутриутробной инфекции и пути ее устранения
Высокий ложноотрицательный результат является важным ограничением в этом исследовании. Принципы внутренней медицины Харрисона. 17-е изд. Современные анатомо-клинические аспекты генитального туберкулеза у женщин. Женский генитальный туберкулез и последующее бесплодие. Женский генитальный туберкулез в Эфиопии. Туберкулез женских половых путей у пациентов, посещающих клинику бесплодия.
Мазок ПЦР у женщин, что это такое, для чего берется и по каким правилам? Данное исследование позволяет очень точно выявить возбудителей различных инфекций и виновников воспалительных процессов (вульвовагинитов). Берется ПЦР анализ у живущих половой жизнью и никогда не обследовавшихся, планирующих беременность, имевших незащищенные половые контакты, мазок сдают и женщины, и мужчины.
Выделение микобактерий из случаев бесплодия у женщин. Место лапароскопии при туберкулезе таза у бесплодных женщин. Генитальный туберкулез в эндокринной клинике. Туберкулез женских половых путей. Тест на манту для диагностики генитального туберкулеза у женщин.
Однако этот отчет проверял только ограниченные условия окружающей среды. Использование наконечника пипетки с аэрозольным барьером необходимо для предотвращения перекрестного загрязнения, а также загрязнения переноса. Поэтому обработка этих осадков может потребовать догадок, особенно во время промывки осадков. Некоторые коммерчески доступные экстракционные и очистные комплекты на основе протокола твердофазной очистки перечислены в Таблица 1.
Полимеразная цепная реакция, именно так расшифровывается ПЦР, дает возможность в небольшом количестве взятого на анализ материала найти генетическую информацию инфекционного возбудителя. Самым распространенным является мазок методом ПЦР на ИППП (хламидии, уреаплазмы, микоплазмы), кстати, эти же инфекции относятся к разряду «скрытых», не дающих явной симптоматики и не выявляющихся при обычных, рядовых исследованиях. Часто проводится диагностика герпетических инфекций, а также различных типов папилломавирусной инфекции. При этом особое внимание уделяется тем типам, которые вызывают рак шейки матки, то есть онкогенным.
Эти наборы устраняют не только догадки, но и трудоемкие стадии извлечения фенол-хлороформа. Обычно это интерпретируется из-за неправильной работы одного или обоих олигонуклеотидных амплимеров с целевым шаблоном. Этот протокол обнаружения также обеспечивает более высокую чувствительность, чем метод детектирования бромида этидия, но требует дополнительных операций блоттинга и гибридизации. Существует два типа анализов с использованием показаний в режиме реального времени и конечных точек. Этот метод, не содержащий геля, имеет несколько других преимуществ по сравнению с обычными методами на основе агарозного геля.
Мазок ПЦР на хламидии и другие инфекции берут у будущих мам, если те во время планирования ребенка его не сдавали. Данное исследование обязательно необходимо, так как скрытые инфекции, передающиеся половым путем, могут много лет «сидеть» в организме, никак себя не проявляя, но очень навредят будущему ребенку, могут привести к выкидышу, преждевременным родам, а вследствие этого гибели плода. Конечно, лучше проводить лечение на этапе планирования ребенка, но если ПЦР диагностика инфекций их обнаружила уже после зачатия - не беда, есть современные безопасные препараты, которые можно принимать будущим мамам.
Что показывает анализ ПЦР?
Например, эта система позволяет значительно увеличить пропускную способность. Анализ флуоресцентного зонда выполняется в 96-луночном формате, и многие из этапов анализа автоматизированы. Анализ представляет собой замкнутую систему, в которой реакционная трубка никогда не открывается после амплификации.
Было показано, что сероэпидемологически выявлено, что от 50 до 80% взрослого населения подвергается воздействию этого патогена. Однако не было никаких последовательных результатов с конкретными патогенами. Поэтому, является ли используемый протокол достаточно чувствительным или нет, невозможно оценить из-за отсутствия информации в таких отчетах.
Многие женщины боятся сдавать анализы, наслушавшись и начитавшись о том, что любые манипуляции «там» врача могут . А тем более нельзя сдавать мазок ПЦР при беременности, так как материал берется из шейки матки, а не с ее поверхности. Но это не страшно. Длина шейки матки немаленькая. Инструмент не попадет в матку, никак не затронет ребенка. И шейку расширять для взятия биоматериала не нужно. безопасен для матери и ребенка и безболезненен.
Некоторые хронические воспалительные заболевания, которые еще не определенно классифицируются как аутоиммунные заболевания, также считаются связанными с некоторыми микробными инфекциями. Однако, в отличие от инфекционных заболеваний, потенциальные или способствующие микробы для таких хронических воспалительных заболеваний, включая аутоиммунные заболевания, не могут быть легко обнаружены у образцов, полученных из конкретного поражения. Даже при таких обстоятельствах последовательное обнаружение бактерий в образцах должно быть критическим в диагностике и будущей терапии.
Делается данное исследование не только с целью обнаружения инфекций, передающихся половым путем, но и возбудителей бактериального вагиноза и кандидоза - гарднерелл и грибов рода Кандида. Так что, расшифровка мазка на ПЦР диагностику бывает полезна и в таких «банальных» случаях.
Чтобы получить точный результат анализа, нужно соблюдать несколько простых правил перед его сдачей. Подготовка к мазку на ПЦР очень проста.
1. Нельзя мочиться за 3 часа до сдачи анализа.
2. Исследование проводится вне приема антибиотиков и антибактериальных средств.
3. Лучше сдавать мазок в середине цикла, но не перед самым началом менструации или сразу после завершения.
4. За 2-3 суток до исследования не использовать местных средств контрацепции и вагинальных препаратов.
5. В течение нескольких часов до сдачи мазка нельзя подмываться и спринцеваться.
6. Половую жизнь нужно прекратить минимум за 1,5 суток до взятия материала.
7. Сдачу мазка следует немного отложить, если накануне были взяты кольпоскопические пробы для выявления заболеваний шейки матки.
Рассеянный склероз: вариации на тему. Вертхайм-ван Диллен и Дж. Ван дер Нордаа. Быстрый и простой метод очистки нуклеиновых кислот. Обработка долговременных архивных шейных мазков для обнаружения вируса папилломы человека с помощью полимеразной цепной реакции.
Стандартизация анализов хламидийной пневмонии: рекомендации Центров по контролю и профилактике заболеваний и Лабораторного центра по контролю за заболеваниями. Зависимость протоколов инактивации продукта полимеразной цепной реакции от длины и состава ампликона.
Внесла одинаковый вклад в эту работу. Задний план. Патофизиология женского полового шистосомоза лишь частично понятна. Результаты. Песчаные пятна и резиновые папулы были найдены у 41 из 118 женщин. Резиновые папулы отражают интенсивную клеточную иммунную реакцию, в которой доминируют эозинофилы, эпителиальная эрозия и жизнеспособная яйцеклетка. Существовало значительное снижение распространенности каучуковых папул с возрастом, даже после корректировки на выделение яичной мочи. Песчаные пятна с зернами показали умеренную клеточную иммунную реакцию и яйцеклетку.
